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| 产地 | |
| 品牌 | Polysciences |
| 货号 | 24765-1 |
| 用途 | 化学转染试剂 |
| 包装规格 | 1 g |
| 纯度 | /% |
| CAS编号 | |
| 别名 | PEI转染试剂 |
| 是否进口 | 是 |
Q:24765-1 的核心参数是什么?
A:货号 24765-1,规格 1 g,产品为线性聚乙烯亚胺盐酸盐(Linear PEI, Transfection Grade),分子量 40,000 Da,自由碱型(free base),纯度 >99%(GPC 验证),Polysciences(美国)原装,室温干燥保存,效期 2 年以上。
Q:配制方法和稳定性? A:标准配法:1 g 干粉溶于 90 mL 去离子水(60℃ 助溶 10–15 分钟),HCl 调 pH 至 7.0 左右后定容至 100 mL,即得 10 mg/mL 储存液;或按常用 1 mg/mL 工作储存液定容至 1 L。过滤除菌后 4℃ 可稳定保存 6–12 个月,-20℃ 分装可保存 2 年,避免反复冻融。注意:未质子化的自由碱 PEI 水溶性差,必须酸化助溶。
Q:转染效率数据如何?
A:在 HEK293F 悬浮细胞中,按 PEI:DNA 质量比 3:1(如每升转染 1 mg DNA 用 3 mg PEI),转染 24–48 h 后 GFP 阳性率可达 70–90%,重组蛋白表达量常见 50–200 mg/L,AAV 产量可达 1×10⁵–1×10⁶ VG/细胞量级,具体取决于载体与细胞系。
Q:为什么比脂质体更适合放大生产?
A:①成本:1 g PEI MAX 市场价约千元级,可转染 50 L 体系;同等规模脂质体费用超万元;②低毒:线性 PEI 40 kDa 毒性显著低于 25 kDa 支化 PEI,转染后无需换液;③无动物源成分,符合 GMP 工艺开发需求(Polysciences 另有 GMP 级 26471 可选)。
Q:常见 FAQ 补充?
A:①能否用于贴壁细胞?可以,但效率低于悬浮 293 细胞;②要不要加增强剂?可搭配 1% 丙戊酸(VPA)或 0.5–1 mM 丁酸钠提高表达;③形成复合物的时间?PEI 与 DNA 混合后室温孵育 10–15 分钟即可加入细胞;④1 g 能做多少次小规模转染?按每次 30 mL 培养液、1 mg/mL PEI 用量 1 mL 计,约可做 500 次。
PEI/DNA 比例计算;转染 SOP 优化;HEK293/CHO 条件排查;病毒载体工艺配套;科研级到 GMP 级产品升级路径建议。