Naive T细胞直接转染实现高效基因编辑，ProteanFect转染试剂盒突破

基因编辑技术在T细胞治疗领域具有重要应用价值，但Naive T细胞的直接基因编辑仍存在显著挑战，其低转染效率一直是领域内的技术瓶颈。ProteanFect转染试剂盒最新实验数据表明，即使是未经激活的Naive T细胞，也能实现基因编辑，为T细胞研究提供了更便捷、更接近生理状态的实验方案。

 

实验设计与方法

以小鼠原代T细胞为模型，靶向Pdcd1基因，采用PT09-ProteanFect CRISPRMax Ultra小鼠原代免疫细胞基因编辑试剂盒进行基因编辑实验。实验设置了三组不同处理条件：

 

D0组：T细胞分离后直接进行转染，转染后在包被抗体的培养板中继续培养

D1组：T细胞激活培养1天后进行转染

D2组：T细胞激活培养2天后进行转染

所有组别在转染后72小时检测基因编辑效率。

 

实验结果与分析

实验数据显示(如图1所示)：

 

D0组(未经激活直接转染)的敲除效率达到54.2%

D1组(激活1天后转染)的敲除效率为56.7%

D2组(激活2天后转染)的敲除效率最高，达到80.2%

 

图1：转染72h后基因敲除效率

 

 

图2：转染72h后TIDE分析结果

以上结果表明：

Naive T细胞直接转染可行性：未经激活的T细胞也能实现有效的基因编辑，打破了传统认知中必须预激活的限制

 

激活状态影响编辑效率：随着激活时间的延长，基因编辑效率逐步提高，D2组效率显著高于D0和D1组

 

实验灵活性提升：ProteanFect转染试剂盒为研究者提供了更多选择，可根据实验需求选择直接转染或激活后转染

 

研究意义与应用前景

本研究的突破性发现为T细胞研究领域带来多重价值：

简化实验流程：Naive T细胞直接转染可节省1-2天的激活时间，加速研究进程

保持细胞原始状态：避免预激活可能带来的细胞状态改变，更真实反映生理条件下的基因编辑效果

灵活的实验设计：研究者可根据需要选择直接转染或激活后转染，平衡效率与细胞状态的需求

临床应用潜力：为CAR-T等细胞治疗产品的开发提供了新的技术路径

 

结论

ProteanFect转染试剂盒在本研究中展现出卓越的性能，不仅证实了Naive T细胞直接转染的可行性，还提供了激活后转染的高效方案。这一技术突破为免疫细胞基因编辑研究提供了更灵活、更高效的工具，将助力基础研究和临床应用的快速发展。

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