StemRD Mgro-500 MesenGro 人间充质干细胞培养基
StemRD Mgro-500 MesenGro 人间充质干细胞培养基

    StemRD Mgro-500 MesenGro 人间充质干细胞培养基

英文名称： MGro-500 Chemically Defined MSC Medium
产品应用： 人间充质干细胞培养
中国俗称： 间充质干细胞无血清培养基  中国简称： 干细胞培养基
注册品牌： StemRD  生产厂家： 美国StemRD公司
订购货号： MGro-500B
规格型号： 500mL
保存温度： 2～8 ℃, -80 ℃
产品种类： 无血清细胞培养基
到货时间： 上海仓库有现货，1～3天到货
产品编码： YS000640

产品英文名称：MGro-500 Chemically Defined MSC Medium
产品中文名称：500 ml人间充质干细胞无血清培养基

MGro-500 Chemically Defined MSC Medium 产品信息
Human mesenchymal stem cells (hMSCs) hold promise for the treatment of a wide variety of diseases. Currently, fetal bovine serum (FBS) is added to the medium to achieve expansion of hMSCs. However, concerns have been raised over animal-born pathogens, immune reactions and lot-to-lot variations caused by the undefined nature of FBS. To address these issues, StemRD has developed MesenGro®, a chemically-defined, serum-free and xeno-free medium for the expansion of hMSCs.
The MesenGro Chemically Defined MSC Medium (for simplicity, referred to as “MesenGro” in this document) has been designed for the maximum expansion of human mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow, cord blood, or adipose tissue.MesenGro is chemically defined as its components are either chemically synthesized, recombinantly produced and purified. It can be considered xeno-free as none of its ingredients are directly derived from non-human animals. MesenGro further offers the convenience of no plate-coating if used with certain tissue culture vessels (see below), saving cost of coating materials and time needed for coating.

MGro-500人间充质干细胞无血清培养基的组成
MesenGro Basal Medium, 1 x 450mL 
MesenGro Supplement, 1 x 50mL

MGro-500 Chemically Defined MSC Medium的保存条件
MesenGro Basal Medium: 2 to 8°C
MesenGro Supplement : -80°

MesenGro-500人类间充质干细胞无清培养基 产品特性
? 无血清 Serum-Free
? 无异种蛋白 Xeno-Free
? 化学成分明确 Chemically-Defined
? 无需昂贵的铺板蛋白 No Plate Coating Necessary
? 生长分化优于血清培养基 Perform Better than FBS Medium

MesenGro Chemically Defined MSC MediumDescription产品英文简述
The MesenGro® Chemically Defined MSC Medium (for simplicity, referred to as “MesenGro”) has been designed for the maximum expansion of human mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow, cord blood, or adipose tissue. MesenGro® is chemically defined as its components are either chemically synthesized, recombinantly produced and purified. It can be considered xeno-free as none of its ingredients are directly derived from non-human animals. MesenGro® further offers the convenience of no plate-coating if used with certain tissue culture vessels (see below), saving cost of coating materials and time needed for coating.
额外的关键试剂要求或建议
没有plate-coating:康宁CellBIND®组织培养的玻璃瓶(如。 ,25厘米 2 组织培养的玻璃瓶,康宁猫# 3289)
plate-coating:纤连蛋白(StemRD猫# Fibro-10或等效)和常规TC-treated组织培养的玻璃瓶
TrypLE ™ 表达(GIBCO # 12604),或0.05%胰蛋白酶/ 0.53毫米EDTA(例如Mediatech # 25 - 051 - ci),或同等学历
改编的msc之前在其他媒体培养:
细胞培养在血清或血清媒体可以快速、轻松地改编成MesenGro。 在大多数情况下,一个
一步进入MesenGro完全培养基就足够了。 如果是这样,步进式适应逐渐增加
的MesenGro(如20%、40%等)也可以被执行。

人类细胞冻存复苏:
冻人msc、不管什么介质用于种植或冻结之前,可以很容易地和迅速适应
MesenGro。 一步过渡到MesenGro介质如下面所列通常是足够的细胞
在媒体血清或血清生长和冷冻。
1。 迅速解冻冷冻瓶细胞37°C水浴。
2。 细胞转移到50毫升锥形管。
3。 每1毫升的细胞悬液,添加10毫升的预热(37°C)MesenGro drop-wise方式完全培养基
同时轻轻旋转管。
4。 板锥形管的内容到一个组织培养瓶或多个细胞培养板的井。 另外,细胞
也可以离心机在250 x g(~ 1200 rpm)10分钟,在MesenGro resuspended完全培养基,然后镀。
5。 孵化在36 - 38°C调湿大气二氧化碳包含4到6%。
6。 24小时后,抛弃旧与新媒体媒介和饲料细胞。
7。 维护文化通过改变介质每2天,直到细胞通道

通过msc MesenGro:

涂层的细胞培养器皿MesenGro时没有必要使用特定的组织培养器皿,例如,

康宁CellBIND®组织文化产品或BD PrimariaTM组织文化产品(25厘米2组织培养的玻璃瓶,BD猫# 353808)。 其他品牌和型号的组织文化船只目前正在评估。 组织文化

没有评估血管或发现不兼容no-coating程序,我们建议

涂层与纤连蛋白(StemRD猫# Fibro-10)为0.5 - 1微克/厘米 2 面积为1小时37°C,紧随其后

电镀MesenGro细胞。

1。 视觉检查股票文化(生长在MesenGro或其他介质配方)在显微镜下并确认细胞准备sub-passaged。 保持*增长潜力的msc、建议的细胞是通过confluency时达到70%。 如果MSC confluency文化是允许达到80%或更高,他们可能通过后停止增殖。 因此,它是至关重要的不是CONFLENCY细胞增长超过80% 在任何情况下!
2。 预热TrypLE™表达(或0.05%胰蛋白酶/ 0.53毫米EDTA)和MesenGro完全培养基在使用前37°C。
3。 删除了(旧)从瓶中使用一个吸管和丢弃。
4。 可选:洗组织培养与DPBS表面,删除和丢弃。
5。 添加TrypLE™表达(或0.05%胰蛋白酶/ 0.53毫米EDTA)瓶,瓶倾斜涵盖所有细胞。 我们建议
在室温下分离的细胞。
 个人的6-well板(~ 10厘米 2 )  T25瓶(25厘米 2 ) 
TrypLE表达量或胰蛋白酶  0.5毫升  1毫升 
6。 在显微镜下观察细胞。 当细胞开始分离,轻敲船的一边来帮助放松
剩余的细胞。 细胞分离所需的时间应该是1 - 3分钟,如果在MesenGro培养细胞。 细胞生长在血清媒体需要孵化时间分离。
一旦所有的细胞分离,迅速进行下面的步骤。 不要离开细胞TrypLE™明示或胰蛋白酶
一段时间的细胞分离后,因为这将影响细胞的生长。
7。 在细胞分离、添加MesenGro胰蛋白酶溶液的体积两倍使用(例如2毫升T25瓶)。 收集
细胞悬液的无菌15毫升锥形管。
可选:如果0.05%胰蛋白酶/ EDTA溶液用于分离细胞,使用大豆胰蛋白酶抑制剂是可取的
中和胰蛋白酶。 这一点尤其必要的清洗步骤(步骤8)如果不能迅速处理(在10分钟)。
(这是由于血清等媒体配方MesenGro不包含抗胰蛋白酶,组件发现在动物
血清。 除非迅速消除离心,胰蛋白酶能破坏细胞并影响经济增长。 如果TrypLE
使用快递
分离的细胞,那么没有必要中和它根据其生产。
8。 在1200转离心细胞(250 x g)10分钟。
9。 追求和去除尽可能多的上清。 Resuspend细胞预热MesenGro完全培养基。 采取
细胞数的整除的细胞悬液。
10。 将细胞放入组织培养血管的密度5 x10 3 细胞/平方厘米。 倾斜的船几次,以确保均匀分布的细胞悬液。
11。 孵化在37°C在湿润的气氛中4 - 6%的二氧化碳。
12。 每2天更换培养基与新鲜,预热MesenGro完全培养基。
13。 通过细胞时,细胞confluency达到80%(通常每隔3天)。
在MesenGro细胞冷冻保存
1。 准备冷冻保存解决方案,补充MesenGro基础培养基MesenGro补充为10%和10%
二甲亚砜(DMSO)。
2。 颗粒细胞,离心,resuspend细胞冷冻保存方案1.0 x10 6
细胞/毫升,cryovials转移。
3。 地方cryovials在冷冻容器(例如耐5100 - 0001)和在-80°C冰箱过夜。
4。 转移cryovials为长期储存液态氮。
介质制备
1。 解冻MesenGro补充。 建议解冻一夜之间在2 - 8°C。 解冻可以整除和材料
储存在-80°C,但进一步冻融周期应该避免。
2。 让100毫升MesenGro完全培养基,无菌添加10毫升MesenGro补充90毫升MesenGro基底
媒介。
3。 抗生素如Pen-Strep解决方案也可以被添加到完全培养基(如果需要的话)。 我们建议*
100单位/毫升浓度的青霉素和链霉素100微克/毫升。
曾经,MesenGro完全培养基(基底,补充和谷酰胺)是稳定的1月当存储在黑暗中
在2 - 8°C。