产品名称：InspireSpark MJ5460 基因编辑试剂盒 国产
产品货号：MJ5460
产品规格：50 rxn（含Solution I 75μL，Solution II 2.5mL）
储存条件：-80℃（长期），-20℃（解冻后）

技术参数：RNP复合物自递送系统，支持2000-4000 bp片段敲入

红荣微再 MJ5460 基因编辑试剂盒 价格优势（Inspire Spark® PrimeRNP Kit）华雅思创现货供应，欢迎咨询

产品概述

Inspire Spark® PrimeRNP Kit 是专为攻克原代细胞基因编辑瓶颈设计的革命性工具。基于自递送CRISPR/SpCas9系统，无需电转仪即可在 人原代T细胞、干细胞及难转染细胞系 中实现85-90%的敲除（KO）/敲入（KI）效率， 解决传统方法毒性高、效率低的难题。

核心优势：三大技术突破

1. 终结电转依赖，解锁原代细胞极限
   传统电转导致原代细胞死亡率>40%，而 Inspire Spark® 通过 eSpCas9-SgRNA自组装复合物（37℃ 5分钟成核），直接穿透细胞膜。实验验证：人原代T细胞转导后存活率>95%，编辑效率稳定达 88.2±3.1%（n=15）。

2. 双高特性：高效率+低脱靶
   对比野生型Cas9， Solution I中优化的eSpCas9蛋白 通过带正电荷结构域增强靶向性，脱靶率降低 4.2倍（全基因组测序验证）。支持多基因同步编辑（≤4基因），KO/KI双功能效率>85%。

3. AAV辅助大片段敲入标准化
   兼容 AAV donor载体（MOI 2×10?-5×10?），实现2000-4000 bp定点整合，KI效率 50-80%。案例：TRAC位点CAR构建成功率78.3%，远超慢病毒方案（<35%）。

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实验流程（以人原代T细胞为例）

一、转导复合物制备

混合1.5μL SgRNA（100μM） + 1.5μL Solution I → 37℃孵育5-10分钟（形成RNP）。

加50μL Solution II（室温预平衡） → 混匀后室温静置5分钟。

二、细胞转导

细胞预处理：激活T细胞48小时后洗涤，离心去培养基（用OptiMEM/PBS清洗残留）。

细胞沉淀重悬于转导复合物 → 37℃孵育45分钟。

三、培养与检测

加600μL含10% FBS + 200U IL-2的T细胞培养基 → 接种至24孔板（密度2-3×10?/mL）。

培养4-5天后检测编辑效率。

关键注意事项

应用场景 操作要点

AAV辅助KI AAV体积≤5μL：RNP制备阶段加入；>5μL：细胞培养阶段加入（MOI: 2×10?-5×10?）

多基因编辑 方案A：混合多靶点RNP；方案B：分步转导（间隔48小时，≤2基因/次）

细胞状态 转导前活性>90%

电转兼容性 Solution I（eSpCas9）可单独用于电转 → 效率较野生型提升30%

产品名称：Inspire Spark® PrimeRNP Kit（基因编辑试剂盒）

货号：MJ5460

规格：50 rxn

Inspire Spark PrimeRNP Kit基因编辑试剂盒，华雅思创现货供应，欢迎咨询

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InspireSpark® PrimeRNP Kit Q&A

Q：T细胞激活48小时后离心清洗的清洗液及铺板培养基要求？

A：清洗液为实验原用的T细胞培养基。操作流程：轻柔吹吸重悬细胞 → 离心（400 ×g, 5

min）→ 彻·底弃上清 → 用新鲜配制的同款T细胞培养基重悬细胞。目的：防止T细胞过度激

活、去除碎片、优化细胞状态。

Q：实验步骤中FBS能否替换为其他添加剂？

A：可使用人AB血清或无血清培养基（注：无血清条件下细胞生长状态可能减弱）。

Q：转导培养基含IL-2或血清替代物是否影响转导？

A：无影响。通过离心清洗彻·底弃除上清（避免血清蛋白干扰），最终使用转导复合物重悬

细胞沉淀即可。

Q：同时编辑两个基因是否需要配置两份混合液？能否同时加入细胞？

A：仅需将RNP1与RNP2加入同一份Solution II中孵育，无需分装多份Solution II。混合后的

复合物可同时加入细胞。

Q：敲除（KO）和敲入（KI）能否同时实现？最多支持几个基因编辑？

A：支持同步操作。多基因编辑需在制备转导复合物时进行多RNP制备，或分次转导（建议

：首·次转导≤2个基因，间隔48小时后再转导≤2个基因）。

Q：Solution II能否搭配其他厂家的Cas9蛋白？是否支持电转

A：可以使用，但未经大量数据验证，无法保证其编辑效率。

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