MEF 饲养层细胞

• 小鼠胚胎成纤维细胞可以在没有LIF的情况下进行干细胞培养

• 在 1 mL 中呈现为 5×10^6个细胞

• 在添加ES细胞之前必须线粒体灭活

Backoround胚胎干细胞(ES)来源于许多物种胚泡的内细胞团(ICM)。它们能够在饲养细胞层上无限制的、未分化的增殖，并保持核典型的正常和表型稳定。此外，胚胎干细胞有能力在体外和体内分化成多种类型的细胞。在mES细胞培养中，可以在生长培养基中添加LIF代替饲喂紫菜。然而，LIF对hES细胞培养的影响不如mES。因此，hES细胞的产生和维持都需要使用供体细胞。

应用程序

胚胎成纤维细胞(MEF)喂养细胞用于维持小鼠或人类胚胎干细胞未分化状态。在加入胚胎干细胞之前，细胞必须有丝分裂灭活，如用丝裂霉素C处理(2-4小时，10 ug/mL)。

质量控制

根据形态学，这个冷冻瓶包含至少5.0 x 106 MEF喂养细胞。台盼蓝染料排除，活细胞计数。MEF饲养细胞检测无微生物污染。

媒介

1. 培养基:D-MEM(高糖)，10%胎牛血清(FBS)， 0.1 mM MEM非必需氨基酸(NEAA)， 2 mM l -谷氨酰胺，1% Pen-Strep(可选)

2. 冷冻培养基:90%胎牛血清，10% DMSO

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