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基因组 DNA分离 用于 qPCR 的 DNA 试剂盒

产品名称：DNA Extraction Kit      产品货号：200600

RUO

RecoverEase DNA 分离试剂盒在不使用有毒有机溶剂提取或乙醇沉淀的情况下，从多种全组织（肝、脾、肾、脑、睾丸）中快速分离并回收高分子量（100 至 500 kb）基因组 DNA。


回收的基因组 DNA 完全水合，*天即可用于多种实验应用，包括 Southern 印迹分析、聚合酶链式反应 (PCR)、脉冲场电泳分析，以及从转基因动物中回收 Lambda 穿梭载体。

仅限研究使用。不可用于诊断目的。

特性

·         从整个组织中分离出高分子量基因组 DNA

·         转基因突变分析中 DNA 分离的理想选择

·         无需有机溶剂提取或乙醇沉淀

·         回收的 DNA 在*天即可使用

·         从 Big Blue 小鼠和其他转基因小鼠中有效回收转基因穿梭载体

·         快速可靠地从全血和各种来源中分离高分子量基因组 DNA

·         从 1 μL 至 5 mL 全血样本中获得可进行 PCR 的基因组 DNA

·         用盐析步骤分离蛋白质，然后用乙醇沉淀 DNA，在所选缓冲液中重新悬浮

工作原理
快速分离高分子量基因组 DNA

RecoverEase DNA 分离试剂盒可在不使用有机溶剂提取或乙醇沉淀的情况下，从多种组织中快速分离高分子量基因组 DNA。该过程涉及组织的物理分解、粗过滤和通过短时离心分离细胞核。然后与含有蛋白酶 K 的高活性蛋白酶溶液一起温育以对细胞蛋白质进行预酶解。

获得可立即使用的 DNA

当 DNA 制备物转移到方便、自由浮动的透析杯中时，酶解继续进行，可利用所述透析杯将酶解肽通过半透膜过夜透析。透析后，从透析杯中收集完全水合的纯化高分子量 DNA。得到的 DNA 长度测定结果均为 100 至 500 kb，可立即用于实验应用，包括 Southern 印迹分析、PCR、脉冲场电泳分析或从转基因动物回收 λ 穿梭载体。

RecoverEase 方法与苯酚-氯仿 DNA 分离方法

RecoverEase 方法仅需 17 小时。该 DNA 分离试剂盒的优点在于可以在早期去除细胞胞质中的核酸酶，消除有毒的有机溶剂（例如苯酚和氯仿），以及减少 DNA 提取和过量处理相关的剪切力。DNA 完全水合，可在透析后立即使用。膀胱和皮肤等某些组织不适合进行均质化或细胞核分离，因此不推荐将它们作为用该分离试剂盒进行基因组 DNA 分离的起始材料。

快速参考协议

DNA提取试剂盒全血

步骤过程时间

1-3洗涤浓缩细胞25分钟

4-7裂解细胞75分钟

8-10从蛋白质中提取核酸30分钟

11-16纯化DNA 30分钟

整个组织

步骤过程时间

1-2组织均一化 10分钟

3-5裂解细胞 2小时

6-9从蛋白质中提取核酸30分钟

10-12纯化DNA 30分钟

培养细胞

步骤步骤所需时间

1 -3浓缩细胞30分钟

4-5洗涤细胞30分钟

6-9裂解细胞1.5小时

10-13从蛋白质中提取核酸30分钟

14-16纯化DNA 30分钟

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